为给大麦主要黄酮类化合物含量的快速测定及开发利用提供依据,对利用高效液相色谱技术（HPLC）分离和同时测定大麦中黄酮类化合物儿茶素、杨梅素、槲皮素、山奈酚含量的方法进行了研究。结果表明,采用HPLC同时测定4种大麦黄酮类化合物的优化色谱条件为：YMC-Pack ODS AM-303（5μm,250 mm-4.6mmi.d.）色谱柱;流动相A-0.1%冰乙酸水溶液,B-乙睛,梯度洗脱;流速0.8 mL/min,进样量10μL。儿茶素、杨梅素、槲皮素、山奈酚分别在0.063-2.000μg（R^2=0.9999）、0.034-1.100μg（R^2=0.9998）、0.025-0.800μg（R^2=0.9993）、0.018-0.560μg（R^2=0.9995）成良好的线性关系,加样回收率分别为96.88%（RSD=1.30%）、98.30%（RSD=0.57%）、96.29%（RSD=1.20%）、101.59%（RSD=0.73%）。测定方法简便、快捷,结果准确、重复性好,可用于大麦4种主要黄酮类化合物的同时测定。完成机构：[1]云南农业大学中药材研究所,云南省中药材规范化种植技术指导中心,云南昆明650201 [2]云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所,云南昆明650205 [3]浙江林学院林业与生物技术学院,浙江杭州311300