茶多酚中残留乙酸乙酯的含量测定

茶多酚中残留乙酸乙酯的含量测定

       茶多酚是从绿茶中提取的多酚类物质，具有很强的清除自由基作用，且具有抗突变、抗癌、抗衰老、抗菌等药理作用，近年来在医疗保健方面引起了广泛的关注。该产品工艺中使用了乙酸乙酯，故应控制残留量。

　　本文用气相色谱法，选用401有机担体为固定相，乙酸丙酯为内标，对茶多酚及其产品中的残留乙酸乙酯进行了含量测定，该方法操作简便，精密度和回收率均较好，可作为制定质量标准乙酸乙酯控制方法的参考。

一、测定仪器、试药及色谱条件

　　仪器：日本岛津GC-RIA型气相色谱仪，RPR-GI微处理机。

　　试药：乙酸乙酯、乙酸丙酯均为分析纯。

　　色谱条件：401有机担体，玻璃柱：3.2mm×1.6m，FID检测器，进样口及检测器温度：200℃，柱温：160℃，理论塔板数（以乙酸乙酯计算）：863，分离度：4.7。

二、测定的线性范围

　　对照贮备液的配制精密量取乙酸乙酯适量，置容量瓶中加水制成2μL/mL的溶液。

　　内标贮备液的配制精密量取乙酸丙酯适量，置容量瓶中加水制成2μL/mL的溶液。

　　测定方法精密量取对照贮备液5份，各精密加入适量内标溶液，加水制成含对照品浓度为0.1～0.8μL/mL，含内标物浓度为0.4μL/mL的梯度溶液，每份进样1μL，连续进样3次，以浓度与对照品/内标峰面积比值进行回归，得回归方程：Y=2.5070X-0.0293r=0.99997.在0.09005～0.72040mg/mL范围内线性关系良好。

　　注：配制对照和内标贮备液用体积计算是为了配制方便，在计算时以比重换算，以下同。

三、回收率测定

　　精密称取已知乙酸乙酯残留量的茶多酚和产品各适量，分别精密加入一定量的对照贮备液，按“样品测定”项下操作，测得茶多酚中乙酸乙酯残留量的回收率为99.41％（n=6），RSD=1.91％，片剂中残留量的回收率为99.48％（n=4），RSD=0.18％

四、精密度试验

　　分别取一批茶多酚及其产品的供试液，进样1μL，连续进样6次，测得茶多酚中残留乙酸乙酯的平均值为5.30％，RSD=0.41％，产品中残留溶剂的平均值为1.25％，RSD=0.43％。

五、样品测定

　　对照溶液的配制精密量取对照贮备液和内标贮备液各适量，置同一量瓶中，加水制成含对照品和内标物均为0.4μL/mL的溶液。

　　供试品溶液的配制

　　茶多酚：精密称取茶多酚约0.1g，置10mL量瓶中，加内标贮备液，加水制成含内标0.4μL/mL的溶液。

　　茶多酚产品：取5粒，精密称定，研细，精密称取约相当于0.1g的茶多酚，按“茶多酚”溶液制备项下方法配制溶液。

　　注：取样量应根据乙酸乙酯残留量而定，应使乙酸乙酯与内标物的峰响应基本一致。

　　测定方法精密量取对照品溶液和供试品溶液各1μL，注入仪器，连续进样3次，按峰面积计算即得。

　　测定结果在上述条件下乙酸乙酯和乙酸丙酯能很好分离，无干扰测定峰出现（图1），对3个厂家的茶多酚和2批片剂中的溶剂残留量进行了测定，结果见表1。